游本昌小时候，曾有人说他活不过十三岁，只有皈依佛才能闯过这一劫。为了防止意外发生，他到了六岁的时候，父母便把他送到上海法藏寺拜兴慈法师为师，法号乘培。
1939年起，游本昌先后在上海、南京等地的小学读书，南京市考棚小学毕业后，曾就读于南京育群中学、商业职业学校、上海立信会计学校。
1951年，高中毕业，由南京市文联推荐加入南京文工团。
1952年初，随团调任上海华东人民艺术剧院演员，同年进入上海戏剧学院表演系学习。
1956年毕业后，分配到**实验话剧院任演员。
1980年，加入中国戏剧家协会。
演艺经历1977年，出演话剧《枫叶红了的时候》，饰演陆峥嵘。
1979年，出演话剧《大风歌》饰演吕产。
1981年，出演电视剧《孔乙己》，饰演孔乙己。
1984年，与虞梦出演童话电影《“下次开船”港游记》，在该影片中饰演洋铁人。
1985年，主演神话喜剧《济公》，在该剧中饰演助人为乐、劫富济贫的济公。
1988年，与王鹰共同主演剧情片《姑苏一怪》，饰演叶天士。
1989年，主演神话喜剧《济公活佛》，饰演济公。
1995年，主演刘国权导演的剧情片《冒牌皇帝》。
1998年，主演电视剧《济公游记》，饰演济公。
2000年，出演哑剧《游先生哑然一笑》。
2003年，主演古装电视剧《清明酒家》，饰演苏师爷。
2004年，与邬倩倩共同主演神话爱情电视剧《九尾狐与仙鹤》，饰演太白金星。
2005年，与曹骏、焦恩俊出演古装神话电视剧《宝莲灯》，饰演太上老君。
2009年，游本昌自导自演神话电视剧《了凡》，饰演云谷会禅师。
2010年，与王紫伊主演悬疑电影《济公古刹风云》，饰演济公；随后与薛之谦出演励志片《一只狗的大学时光》，饰演三轮车大爷；同年，与杨紫琼出演动作片《剑雨》，饰演行痴禅师。
2011年，与房祖名出演爱情片《李献计历险记》，饰演老李献计；同年，主演动作片《刀见笑》，饰演唐胖子。
2012年，出演爱情片《画皮2》，饰演炼丹**。同年，出演电影《老万加油》，在片中饰演老万的上司。
2013年，与郭涛出演青春爱情片《致命闪玩》，饰演老绅士；随后，与吴孟达出演剧情片《大片》，饰演病人；同年，与张智霖出演爱情片《白狐》，饰演沙夜**。
2015年6月，主演话剧《弘一**――最后之胜利》和《济公办学》在甘肃兰州上演。
2018年3月，入选《中国电视剧60年大系u2022人物卷》。
主要作品 导演作品 上映时间 作品名称 备注 1962 扣子 少年儿童电视剧 1973 大轮船来了 少年儿童电视剧 1973 不寻常的故事 少年儿童电视剧 1995 济公游记 担任主演、出品人 2000 哑然一笑 哑剧 出品作品 上映时间 作品名称 备注 1995 济公游记 担任主演、导演 个人生活剃度出家
2009年7月28日下午3点30分，游本昌在黑龙江省绥芬河市大光明寺剃度出家。
2009年7月29日上午9点，游本昌正式由畅怀法师受出家沙弥戒，并赐法名定畅。
人物评价*怕很多人都是从“鞋儿破、帽儿破、身上的袈裟破”的济公一角开始认识游本昌的，殊不知，那个时候的他， 已经52岁，在话剧舞台上创造了不少经典角色，尤其在《克里姆林宫的钟声》里成功地扮演了列宁，还参加了列宁诞辰九十周年纪念演出。从小就想拍电影的游本昌，从春晚到《济公》，两次跨界，才真正从舞台的四方天地走了出来，用他的话说，“一夜之间，超过了以前我所有的观众”。（CNTV评）
对于大多数观众来说，游本昌饰演的经典角色莫过于济公和尚了。哼一句“鞋儿破，帽儿破”，一个喜怒笑骂、惩恶扬善的济公形象就清晰地浮现在眼前。（中国台州网评）